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克隆載體 |
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克隆載體（Cloning Vector）：通常採用從病毒、質粒或高等生物細胞中獲取的DNA作為克隆載體，在載體上插入合適大小的外源DNA片段，並註意不能破壞載體的自我複制性質。將重組後的載體引入到宿主細胞中，並在宿主細胞中大量繁殖。常見的載體有質粒，噬菌粒，酵母人工染色體。 對載體的要求：①能在宿主細胞中復制繁殖，而且最好要有較高的自主複製能力。 ②容易進入宿主細胞，而且進入效率越高越好。 ③容易插入外來核酸片段，插入後不影響其進入宿主細胞和在細胞中的複制。這就要求載體DNA上要有合適的限制性核酸內切酶位點。 ④容易從宿主細胞中分離純化出來， 這才便於重組操作。 ⑤有容易被識別篩選的標誌，當其進入宿主細胞、或攜帶著外來的核酸序列進入宿主細胞都能容易被辨認和分離出來。這才介於克隆操作 |
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