厭氧培養（anaerobic culture）指把微生物置於與分子態氧隔絕狀態下所進行的培養。適用於兼性厭氧菌和專性厭氧菌。由於目的不同而有不同的培養方法，可分為以下幾大類：
（1）與空氣隔絕或盡量少接觸空氣的培養法：在三角瓶瓶頸以下裝滿液體培養基，通過煮沸把溶解的空氣趕出後，立即冷卻進行細菌接種。由於發酵而產生H2和CO2時，就可進一步確認是厭氧細菌。另外，把瓊脂培養基加入普通試管約10厘米高度進行穿刺培養，或移植於液體培養基和固體斜面培養基上以後，再加一層液體石臘或礦物油，用這些方法可防止與空氣接觸。
（2）除掉空氣的方法：把微生物裝入耐壓容器中進行真空培養，或充滿二氧化碳、氫氣、氮氣、氬氣等。這些氣體可把事先混入的微量氧氣除掉。在氫存在時，可用置換後飛濺火花等方法來除掉殘存的氧氣（3）去氧的方法：使用鹼性鄰苯三酚（pyrogallol） 、黃磷、金屬鉻和稀硫酸進行化學除氧，或使用好氧細菌及發芽的種子，使通過呼吸而消耗掉氧氣。
（4）在培養基中加入還原劑（如0.1%的巰基乙酸鈉鹽，0.01%的硫化鈉等）。以上各種方法進行適當組合就能進一步確認厭氧細菌。為了確定厭氧性，可在鹼性條件下加入葡萄糖並加熱，與配製的還原型次甲藍（美藍）溶液一起加入，保持脫色狀態即可。
厭氧培養——微生物厭氧培養。可利用厭氧產氣袋法進行厭氧培養。
規格2.5L的產氣袋只能將2.5L容積內的氧氣完全吸收，轉化成二氧化碳，同理，3,5L的產氣袋能吸收3.5L容積的氧氣。微需要產氣袋和二氧化碳產氣袋亦是如此，為達到相應的氧氣濃度和二氧化碳濃度，不僅容積要固定，放置的培養物數量也基本要裝滿，在出廠前都根據計算設定好了的，所以，培養也需要在設定的條件下進行。
日本三菱的厭氧培養罐有兩種規格：2.5L（13.5*19.7*9.5cm,容納12只9cm標準培養皿），配套使用1只2.5L規格的厭氧產氣袋；7.0L（21.3* 28.0*11.2cm,容納42只9cm標準培養皿），配套使用3只2.5L規格的厭氧產氣袋或者2只3.5L的厭氧產氣袋。兩種都是長方體，原廠的產氣袋培養後不會產生負壓，直接可以打開，所以不需要洩壓孔。
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